GC-MS/MS测定替米沙坦片中10种亚硝胺类基因毒性杂质

目的 建立GC-MS/MS同时测定替米沙坦片中N-亚硝基二甲胺(NDMA)、N-亚硝基甲乙胺(NMEA)、N-亚硝基二乙胺(NDEA)、N-亚硝基-N-乙基异丙胺(NEIPA)、N-亚硝基二异丙胺(NDIPA)、N-亚硝基二正丙胺(NDPA)、N-亚硝基二正丁胺(NDBA)、N-亚硝基哌啶(NPIP)、N-亚硝基吡咯烷(NPYR)和N-亚硝基吗啉(NMOR)10种亚硝胺类基因毒性杂质的含量。方法样品经甲醇提取,经Agilent VF-WAXms(30 m×0.25 mm,1μm)毛细管气相色谱柱分离,采用多反应离子监测(MRM)模式进行定量分析。结果 NDMA、NMEA、NDEA、NEIPA、NDIPA、NDPA、NDBA和NPIP在0.2～50 ng·mL^–1线性关系良好,相关系数均为1.000 0;检测限均为0.05 ng·mL^–1,定量限均为0.2 ng·mL^–1,平均回收率分别为103%(RSD=9.2%,n=9),108%(RSD=6.1%,n=9),107%(RSD=5.3%,n=9),106%(RSD=3....     

伏立康唑在新西兰白兔眼组织中的浓度测定及眼组织分布研究

目的 建立新西兰白兔眼组织中伏立康唑浓度的测定方法,并应用于玻璃体腔注射伏立康唑的眼组织分布研究。方法 采用高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）法测定兔眼组织中伏立康唑浓度。以甲苯磺丁脲为内标,色谱柱为Waters X-Bridge BEH C₁₈（50 mm×2.1 mm,2.5 μm）,流动相A：0.2%甲酸-水溶液;流动相B：0.2%甲酸-乙腈溶液;梯度洗脱程序：0～0.30 min,30% B;0.30～1.81 min,30%→90% B;1.81～2.30 min,90% B;2.30～2.31 min,90%→30% B;2.31～2.60 min,30% B;体积流量为0.5 mL·min^-1,柱温30℃,进样量1 μL。使用电喷雾离子源,以多重反应监测方式进行正离子扫描,用于定量分析的离子对分别为m/z 350.1→281.1（伏立康唑）、m/z 271.1→155.0（内标）。新西兰白兔按照体质量、性别随机区间分成5组,每组6只,雌雄各半。无菌条件下,新西兰白兔眼部散瞳,im氯胺酮12 mg·kg^-1、赛拉嗪3 mg·kg^-1麻醉动物,玻璃体腔注入伏立康唑眼用注射剂,分别在行玻璃体腔注射术后的0.5、1.0、4.0、24.0、48.0 h,过量麻醉后放血处死试验兔。冰浴条件下分离兔眼组织（结膜、角膜、房水、虹膜、晶体、玻璃体、视网膜、脉络膜、巩膜）,采用建立的HPLC-MS/MS测定各组织中伏立康唑浓度。结果 伏立康唑质量浓度在0.5～500.0 ng·mL^-1,线性关系良好（R²＞0.98）,定量下限为0.5 ng·mL^-1。批内精密度（RSD）和准确度（RE）均小于15%,伏立康唑各眼组织的提取回收率均大于85%;新西兰白兔单眼单次给予伏立康唑后,其主要在眼后段分布,且视网膜浓度相对玻璃体、脉络膜更高。结论 建立的伏立康唑测定方法分析时间短,能够快速检测眼组织中的药物,准确度和灵敏度高,适用于伏立康唑在眼组织的分布研究。     

基于UPLC-Q-Exactive Focus-MS/MS技术的酸枣仁化学成分分析及其抗阿尔茨海默病机制的网络药理学研究

目的 通过超高效液相色谱-静电场轨道阱高分辨质谱（UPLC-Q-Exactive-Focus-MS/MS）分析酸枣仁中的化学成分,依据解析的化学成分及中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）、本草组鉴数据库（HERB）获取的酸枣仁主要成分结合网络药理学和分子对接技术初步预测其抗阿尔茨海默病（AD）的药效物质基础,筛选出潜在功效成分,预测作用机制。方法 采用UPLC-Q-Exactive Focus-MS/MS对酸枣仁进行化学成分分析,分别在正、负离子模式下扫描,结合对照品、文献中的碎片离子信息、保留时间进行匹配,确认化学成分。利用TCMSP、HERB数据库获取酸枣仁的主要成分及其对应作用靶点信息;通过GeneCards、OMIM数据库获得AD相关疾病靶点;将酸枣仁主要成分对应靶点与AD靶点取交集,借助String 11.5平台和Cytoscape 3.7.2软件绘制交集基因蛋白质相互作用（PPI）网络;利用DAVID 6.8对核心靶点进行基因本体（GO）功能与京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析,通过微生信云平台对富集结果可视化;借助AutoDock Tools软件对核心成分及关键靶点基因进行分子对接。结果 酸枣仁定性分析中共鉴定出40个化合物,主要包括3个有机酸类、28个黄酮类、8个生物碱类、1个皂苷类;筛选出发挥改善AD作用的核心成分5个,包括拟雌内酯、油酸、山柰酚、乌药碱、酸李碱;酸枣仁改善AD的核心靶点有JUN、AKT1、STAT3、MAPK14、ESR1、IL16等;KEGG通路分析共得到157条通路,其中PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路、HIF-1信号通路排名靠前;GO富集分析得到生物过程（BP）条目336个、细胞组分（CC）条目45个、分子功能（MF）42个。分子对接结果显示,酸枣仁的4个核心成分与关键靶点间存在分子结合位点且结合能较强,均小于-20.93 kJ·mol^-1。结论 通过UPLC-Q-Exactive-Focus-MS/MS解析的化学成分结合网络药理学、分子对接预测了酸枣仁是通过多成分、多靶点、多途径来发挥抗AD作用的。     

银翘解毒片中掺伪山银花成分监测

目的：建立银翘解毒片中掺伪山银花成分灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的检测方法。方法：采用高效液相色谱-电喷雾检测器法（HPLC-CAD）,色谱柱为Superiorex ODS C18（250 mm × 4.6 mm,5 μm）,乙腈-水为流动相梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,雾化器温度45℃,采集频率10 Hz,滤光片10.0 s,并对检出的掺伪山银花采用高效液相色谱-质谱联用方法确认。结果：灰毡毛忍冬皂苷乙在0.239 ~ 7.158 μg内呈良好线性关系,r = 0.999 2（n = 7）,平均回收率为99.43%,RSD = 0.94%（n = 9）;川续断皂苷乙在0.202 ~ 6.066 μg内呈良好线性关系,r = 0.999 3（n =7）,平均回收率为98.86%,RSD = 0.76%（n = 9）。结论：该方法科学、准确,适用于银翘解毒片中掺伪山银花,以检查保证用药安全。     

LC–MS/MS method for the quantitation of decitabine and venetoclax in rat plasma after SPE: Application to pharmacokinetic study

This study developed a novel, sensitive and selective LC-MS/MS method for the concurrent determination of DCB and VTX in rat plasma using encorafenib as internal standard (IS). To identify DCB, VTX, and IS, the positive multiple reaction monitoring (MRM) mode was used. Chromatographic separation was carried out using a reversed-phase Agilent Eclipse plus C18 column (100 mm × 2.1 mm, 3.5 µm) and an isocratic mobile phase made up of water with 0.1% formic acid and acetonitrile (50:50, v/v, pH 3.2) at a flow rate of 0.30 mL/min for 3.0 min. Prior to analysis, the DCB and VTX with the IS were extracted from plasma using the solid-phase extraction (SPE) method. High recovery rates for DCB, VTX and IS were achieved using the C18 cartridge without interference from plasma endogenous. The developed method was validated as per the FDA guidelines over a linear concentration range in rat plasma from 5–3000 and 5–1000 ng/mL for DCB and VTX, respectively with r² ≥ 0.998. For both drugs, the lower limits of detection (LLOD) were 2.0 ng/mL. After the HLOQ sample was injected, less than 20% of the LLOQ of DCB, VTX, and less than 5% of the IS carry-over in the blank sample was attained. The overall recoveries of DCB and VTX from rat plasma were in the range of 90.68–97.56%, and the mean RSD of accuracy and precision results was ≤6.84%. For the first time, the newly developed approach was effectively used in a pharmacokinetic study on the simultaneous oral administration of DCB and VTX in rats that received 15.0 mg/kg of DCB and 100.0 mg/kg of VTX.     

脉抒对高脂血症金黄地鼠血脂及血管内皮功能的影响

目的:观察脉抒(Mai Shu,MS)对高脂血症金黄地鼠血脂和血管内皮功能的影响。方法:以高脂膳食诱导高脂血症金黄地鼠模型,给予不同剂量脉抒(低剂量:1 g/kg/d、中剂量:2 g/kg/d、高剂量:4 g/kg/d),观察给药2、4、8周后血清总胆固醇(Total Cholesterol,TC)、三酰甘油(Triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(High Density Lipoprotein Cholesterol,HDLC)、非高密度脂蛋白胆固醇(non-high Density Lipoprotein Cholesterol,non-HDL-C)的变化;采用快速蛋白液相色谱(Fast Protein Liquid Chromatography,FPLC)技术分离给药8周后血清中极低密度脂蛋白(Very Low Density Lipoprotein,VLDL)、低密度脂蛋白(Low Density Lipoprotein,LDL)、高密度脂蛋白(High Density Lipoprotein,HDL),并检测其所含的总TC含量;测定肝脏TC、TG含量,计算肝指数;采用全自动血液黏度仪检测8周后全血血黏度值;采用离体微血管压力直径灌流系统观察各组金黄地鼠肠系膜小动脉对不同浓度梯度乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)诱导的内皮依赖性舒张反应的变化,评价脉抒对血管内皮功能的影响。结果:脉抒高、中剂量在2、4、8周均能明显降低高脂血症金黄地鼠血清TC含量(P0.01、P0.01、P0.05;P0.01、P0.01、P0.01),还可以显著降低血清VLDL、LDL、HDL所携带的胆固醇水平(P0.05,P0.01),并且能够降低地鼠肝组织TC(P0.01,P0.05)、TG的含量(P0.01,P0.05),抑制肝指数(P0.01,P0.05),改善中切(P0.01,P0.05)和高切(P0.05,P0.05)全血黏度,脉抒中剂量还可以改善高脂血症金黄地鼠的血管内皮舒张功能。结论:脉抒具有改善高脂血症金黄地鼠血脂、全血黏度和血管内皮舒张功能的作用。     

健脾益肾颗粒联合替米沙坦对代谢综合征患者肝肾功能及血管内皮功能的影响

目的:观察健脾益肾颗粒联合替米沙坦对代谢综合征(metabolism syndrome,MS)患者肝肾功能及血管内皮功能的影响。方法:选取2012年8月—2015年1月在本院接受治疗的MS患者158例,随机分成对照组和观察组,每组79例。对照组给予替米沙坦治疗,观察组在对照组治疗的基础上加用健脾益肾颗粒治疗。观察治疗前后两组患者肝肾功能、血管内皮功能的变化情况。结果:治疗后,两组ALT、AST、BUN、Cr水平比较,差异无统计学意义(P0.05);治疗后,观察组NO、SOD、FMD、ET-1水平均优于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:健脾益肾颗粒联合替米沙坦可显著改善MS患者血管内皮功能,且不会对肝肾功能造成影响。     

硫磺熏蒸对浙贝母中贝母素甲和贝母素乙在大鼠体内药动学的影响

目的采用液相-质谱联用(LC-MS/MS)分析硫磺熏蒸(硫熏)对浙贝母中贝母素甲、贝母素乙在大鼠体内药动学的影响。方法 SD大鼠分别ig给予硫熏、鲜切浙贝母提取物(生药剂量15 g/kg),采用LC-MS/MS技术检测贝母素甲和贝母素乙的血药浓度,并用3P97软件计算药动学参数。结果硫熏浙贝母中贝母素甲和贝母素乙的主要药动学参数:达峰浓度(Cmax)分别为(66.40±4.65)、(146.72±10.88)ng/m L,药时曲线下面积(AUC0~t)分别为(181.79±7.85)、(457.38±58.81)ng·h/m L;鲜切浙贝母中贝母素甲和贝母素乙的主要药动学参数:Cmax分别为(186.37±18.80)、(227.65±7.01)ng/m L,AUC0~t分别为(197.70±18.69)、(566.16±41.55)ng·h/m L。硫熏浙贝母组大鼠体内贝母素甲、贝母素乙的Cmax、AUC0~t明显低于鲜切浙贝母组。结论硫熏降低浙贝母中贝母素甲、贝母素乙的血药浓度,影响浙贝母中主要生物碱贝母甲素和贝母乙素的药动学行为。     

HPLC-DAD-ESI-Q-TOF/MS法测定金银忍冬花中的化学成分

目的运用HPLC-DAD-ESI-Q-TOF/MS法鉴别和测定金银忍冬中主要化学成分。方法采用HPLC-DAD-ESI-Q-TOF/MS技术对金银忍冬中化学成分进行鉴别,采用HPLC-DAD法分析测定金银忍冬中的主要化学成分的量。结果从金银忍冬中检测到31个色谱峰,并鉴定出19种化学成分,测定了金银忍冬3个花期中10种主要成分(马钱酸、绿原酸、马钱苷、莫诺苷、断氧化马钱苷、芦丁、金丝桃苷、木犀草苷、异绿原酸A、异绿原酸C)的量。结论金银忍冬花蕾期的主要化学成分量高于白花期和黄花期;金银忍冬花蕾与金银花中10种化学成分的量及分布特征相近;为开发利用金银忍冬药用资源提供数据支持。